小众达建议在收集和收集上清液之前，以5000 rpm的速度离心。
如果细胞裂解液中含有过多的不溶物，则背景会很深。
同时，延长封闭时间以增加二抗稀释度。
另外，考虑抗体质量可能是最重要的。
从结果来看，抗体的特异性似乎不强。
尽管尚不清楚特定的样品负载量，但ELC的开发不应包括传统20-50ug负载的可见条带。
我为iNOS工作约130KD，但之前遇到过一些问题。
电泳和转录条件未明确写出。
目标蛋白质是否确实与分离凝胶兼容？
转印膜够了吗？
内部参考β-肌动蛋白的分子量很小，很难说其靶蛋白作用良好。